检测项目

1.结合亲和力测定:平衡解离常数(Kd)范围10^-4-10^-12M

2.结合位点分析:表观结合位点数(n=0.8-1.2)

3.动力学参数测定:结合速率常数(kon)110^3-110^7M^-1s^-1;解离速率常数(koff)110^-6-110^1s^-1

4.热稳定性评估:Tm值变化范围15℃

5.结构表征:结合界面分辨率≤3

检测范围

1.重组蛋白:大肠杆菌/哺乳动物表达系统制备的纯化蛋白

2.抗体药物:单克隆抗体/双特异性抗体的抗原结合域验证

3.细胞裂解液:内源性蛋白复合物的共沉淀分析

4.膜蛋白体系:GPCR与配体蛋白的相互作用研究

5.纳米颗粒偶联物:蛋白修饰载体的结合效率验证

检测方法

ISO5868-2020表面等离子体共振技术通则

ASTME2968-21等温滴定量热法操作规范

GB/T34814-2017荧光共振能量转移法测定通则

ISO10993-22:2017生物材料蛋白质吸附试验方法

GB/T39150-2020微量热泳动技术应用指南

检测设备

BiacoreT200:表面等离子体共振仪,实时监测结合动力学参数

MicroCalPEAQ-ITC:等温滴定量热仪,测量焓变与熵变值

OctetRED384e:生物膜干涉仪,支持高通量亲和力筛选

JascoJ-1500:圆二色光谱仪,分析二级结构变化

NanoTemperMonolithNT.115:微量热泳动仪,适用于低溶解度样本

ThermoOrbitrapFusionLumos:高分辨质谱仪,解析复合物组成

MalvernZetasizerUltra:动态光散射仪,测定复合物粒径分布

Cytation5:多功能酶标仪,完成FRET/BRET实验检测