检测项目

CD45总表达量测定:采用荧光强度定量分析(MFI≥10^3)

CD45RA/RO亚型分型:阈值设定为阳性细胞占比≥20%

CD45跨膜结构域完整性检测:WesternBlot法验证(分子量180-220kDa)

磷酸化CD45(Tyr394)活性测定:ELISA法(灵敏度0.1ng/mL)

CD45与其他标记物共表达分析:多色流式组合(≥8色方案)

检测范围

外周血单核细胞分离样本(密度梯度离心法获取)

骨髓穿刺液石蜡包埋切片(厚度4-5μm)

淋巴组织冰冻切片(保存温度-80℃)

培养细胞系悬浮液(活细胞率≥95%)

体液脱落细胞离心沉淀物(离心力300g)

检测方法

流式细胞术:ISO15189:2022医学实验室标准

免疫组织化学:GB/T37864-2019生物样本预处理规范

蛋白质印迹法:ASTME3106-18抗体特异性验证指南

酶联免疫吸附试验:GB/T40367-2021体外诊断试剂盒技术要求

荧光显微成像:ISO19001:2018光学系统校准规程

检测设备

BeckmanCoulterCytoFLEXLX流式细胞仪(13激光配置)

LeicaBOND-III全自动免疫组化染色系统

ThermoFisherMultiskanSkyHigh酶标仪(波长范围340-850nm)

AgilentBioTekCytation5细胞成像多功能仪

SiemensImmulite2000XPi化学发光分析仪

Eppendorf5430R高速冷冻离心机(最大转速30,000rpm)

RocheVentanaBenchmarkUltra染色平台

BDFACSAriaIII分选型流式细胞仪(4-2-2喷嘴配置)

OlympusBX53荧光显微镜(DP80双摄像头系统)

SartoriusQuintix224-1CN分析天平(精度0.1mg)