可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 关山樱新鲜花枝与整株 | 园林景观工程验收、行道树与樱花园品种确认 | 花径、花瓣数目、花色、萼筒形状、幼叶颜色、叶缘锯齿等形态性状记载 | GB/T 19557.1-2004 性状记载规范;体视显微镜观察 |
| 樱花苗木与接穗 | 苗木采购核验、品种真实性与种苗贸易质量确认 | MNP分子指纹、DNA条形码比对、染色体倍性分析 | GB/T 38551-2020 植物品种鉴定 MNP标记法;流式细胞术 |
| 干燥与盐渍樱花瓣 | 花茶及食品风味原料验收、掺假排查 | 短片段DNA条形码、黄酮苷与花色苷HPLC指纹、花瓣显微特征 | 高效液相色谱指纹比对;显微鉴别 |
| 樱花提取物与风味原料 | 香精香料原料溯源、化妆品与食品原料质量控制 | 特征峰群匹配度、指标成分定量、原料一致性核查 | HPLC-DAD指纹图谱比对 |
| 樱花组培苗与愈伤组织 | 组培快繁生产线纯度核验、脱毒苗确认 | ISSR分子标记、倍性流式检测、培养物纯净度检查 | 植物组织培养鉴定流程;流式细胞术 |
| 樱花花粉 | 育种与授粉研究、花粉形态数据库建设 | 花粉极轴与赤道轴测量、萌发孔类型、表面网状纹饰观察 | 扫描电镜形态观察;花粉活力染色 |
| 硅胶干燥叶片 | 产地田间远程取样送检、批量样品筛查 | 基因组DNA提取质量、rbcL、matK与内转录间隔区扩增测序 | CTAB提取法;毛细管电泳测序 |
检测项目
1. 花部形态性状:花径4.0-5.5cm,重瓣花瓣20-30枚,浓桃粉色,花叶同放,幼叶红褐色
2. DNA条形码鉴定:内转录间隔区序列与参照序列相似度不低于99%,rbcL与matK联合比对确认樱属及晚樱品种群
3. MNP品种指纹:依据GB/T 38551-2020构建数字化分子指纹,与参照品种比对给出同一品种或近似品种结论
4. 倍性与花粉育性:体细胞染色体2n=24(三倍体),基因组DNA含量约为二倍体参照的1.5倍,花粉可染率极低
5. 化学特征指纹:HPLC黄酮苷与花色苷特征峰群比对,特征峰保留时间相对标准偏差小于2%
检测范围
1. 关山樱(日本晚樱栽培品种):花枝、整株、叶片、苗木、接穗
2. 近缘晚樱品种:普贤象、松月、一叶、郁金等易混淆品种
3. 干燥与盐渍樱花瓣:花茶原料、食品装饰用干花
4. 樱花提取物:水提与醇提浓缩物、风味粉末
5. 组培材料:组培苗、愈伤组织、花粉
检测方法
1. GB/T 38551-2020 植物品种鉴定 MNP标记法
2. GB/T 19557.1-2004 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 总则
3. GB/T 24884-2010 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 梅(李属近缘树种参照)
4. 植物DNA条形码法:核糖体内转录间隔区与质体rbcL、matK片段联合扩增测序比对
5. 形态学与显微鉴定:体视显微镜花部性状记载、扫描电镜花粉形态观察
检测设备
1. 体视显微镜:放大7.5-60倍,变焦比1:8,配数码成像系统
2. 生物显微镜:放大40-1000倍,用于花器官切片与表皮显微特征观察
3. 梯度PCR仪:96孔样品台,温度控制4-99摄氏度,升降温速率每秒5摄氏度
4. 毛细管电泳基因分析仪:8道毛细管,单次读长800碱基以上
5. 实时荧光定量PCR仪:五色荧光通道,温度均一性±0.25摄氏度
6. 高效液相色谱仪:四元梯度泵,二极管阵列检测器波长190-800纳米
7. 流式细胞仪:前向散射与荧光双参数检测,用于倍性DNA含量测定
8. 扫描电子显微镜:分辨率3纳米,放大5-300000倍,观察花粉表面纹饰
9. 超微量分光光度计:核酸浓度测定范围每微升2-15000纳克
10. 凝胶成像分析系统:蓝光白光紫外三光源,用于电泳条带判读