可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 大蒜鳞茎(蒜头) | 紫皮蒜、白皮蒜、独头蒜等品种真实性核查,地理标志产品确权 | 品种真实性SSR/MNP分子鉴定、鳞茎横径、单头瓣数、皮色等DUS性状、大蒜素含量指纹 | GB/T 38551-2020 MNP标记法;农业农村部大蒜品种DUS测试指南;GB/T 19557.1-2004总则 |
| 大蒜蒜种(蒜瓣与脱毒蒜种) | 种蒜繁育、经营流通环节的品种纯度与真实性把关 | 品种纯度(单株基因型一致率)、品种真实性比对、脱毒状态核查 | GB/T 38551-2020 MNP标记法;SSR荧光标记毛细管电泳分型 |
| 大蒜植株(叶片与鳞芽) | 苗期田间早期品种识别、混杂苗与变异株筛查 | 基因组DNA提取与质量评价、SSR基因分型、SNP位点筛查 | 改良CTAB法提DNA;梯度PCR扩增;毛细管电泳片段分析 |
| 蒜苔与青蒜(蒜苗) | 采收期产品器官的品种溯源与冒名品种识别 | 品种分子指纹比对、可量测形态性状记载、辛辣风味相关硫化合物组成 | SSR/MNP分子标记法;气相色谱质谱联用测定挥发性含硫化合物 |
| 脱水蒜片、蒜粉等加工品 | 出口与采购环节的原料大蒜品种溯源、掺混品种识别 | 降解DNA短片段基因分型、大蒜素及挥发性有机硫指纹 | ISO 5560:1997脱水大蒜规格关联;MiniSTR短扩增子与靶向测序复核 |
| 组培脱毒苗与鳞茎愈伤材料 | 茎尖脱毒组培扩繁体系的遗传稳定性评价 | 克隆一致性核查、组培变异检出、基因型档案建立 | SSR位点逐单株分型;MNP标记法高密度位点验证 |
| 大蒜种质资源与近缘材料 | 地方品种整理、种质库建库编目、亲缘关系分析 | 遗传多样性评价、聚类分析与指纹图谱构建、特异性位点筛选 | GB/T 19557.1-2004;SSR与MNP多标记联合分型 |
检测项目
1. SSR分子标记鉴定:核心引物8-24对,等位基因片段100-350bp,遗传相似度阈值判定品种同一性
2. MNP标记法品种鉴定:多核苷酸多态性位点1000个以上,样品与参考品种基因型一致率不低于99%判定同品种
3. DUS形态学鉴定:鳞茎横径4.0-6.5cm、单头瓣数6-14瓣、皮色与抽苔性等性状分级记载,需两个完整生长周期
4. SNP基因分型:分型位点数百至数千个,无性繁殖群体单株间基因型一致率核查,芽变系差异位点检出
5. 特征成分指纹辅助鉴别:大蒜素含量0.3%-1.2%(鲜重计),挥发性有机硫化合物组成比例的品种间差异比对
检测范围
1. 紫皮蒜类品种:地方紫皮蒜种群、地理标志登记的紫皮大蒜品种
2. 白皮蒜类品种:传统白皮大蒜、出口型高瓣数白蒜品种
3. 独头蒜与多瓣蒜:独头蒜专项材料、瓣数与排列方式各异的栽培类型
4. 脱毒蒜种与组培苗:茎尖脱毒原原种、原种及各级繁殖材料
5. 大蒜加工品原料:脱水蒜片、蒜粉、冻干蒜粒等产品的原料品种溯源
检测方法
1. GB/T 19557.1-2004 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 总则
2. GB/T 38551-2020 植物品种鉴定 MNP标记法
3. 农业农村部发布的大蒜品种特异性、一致性和稳定性测试指南(DUS专项指南)
4. ISO 5560:1997 脱水大蒜(Dehydrated garlic)规格与品质关联评价
5. UPOV植物新品种测试技术文件(TGP系列)中分子标记与形态测试结合应用的相关导则
检测设备
1. 梯度PCR仪:96孔模块,温度范围4-99℃,梯度温差最大30℃
2. 毛细管电泳遗传分析仪:8道毛细管,荧光5色检测,片段分辨率1bp
3. 荧光定量PCR仪:温度精度±0.1℃,支持探针法SNP基因分型
4. 高通量测序平台:双端150bp读长,单次运行数据量Tb级
5. 垂直板电泳系统:电压50-300V,聚丙烯酰胺凝胶浓度6%-12%
6. 凝胶成像分析系统:500万像素以上CCD,紫外与蓝光双光源
7. 超微量分光光度计:DNA浓度测定范围2-15000ng/μL
8. 组织研磨仪:振荡频率30Hz,适配96孔板低温批量研磨
9. 体视显微镜:放大倍率7-45×,鳞芽与蒜瓣形态性状观察
10. 气相色谱-质谱联用仪:质量范围1.2-1100m/z,挥发性含硫化合物指纹测定