检测项目
1.形态学鉴定:成虫体长2.8-3.5mm,鞘翅具纵向凹纹及金属光泽;幼虫头壳宽度0.450.03mm
2.分子生物学检测:COI基因序列比对(目标片段658bp),18SrRNA特异性引物扩增
3.寄主植物关联性分析:可可树叶片损伤面积≥30%时判定为阳性侵染
4.抗药性监测:氯氰菊酯LC50值测定(浓度梯度0.1-100ppm)
5.生态习性观察:产卵量统计(单雌日均产卵量15-20粒),孵化率测定(温控251℃)
检测范围
1.可可种植园新鲜叶片样本(含水率≤12%)
2.进出口检疫用干燥标本(保存温度-20℃)
3.农药残留测试样本(前处理需符合GB23200.113-2018)
4.实验室人工饲养虫体(代数≤F5)
5.土壤中越冬蛹体筛查(取样深度10-15cm)
检测方法
1.ASTME1752-17《植物害虫显微鉴定标准规程》
2.ISO/IEC17025:2017分子生物学实验室质控体系
3.GB/T27635-2011《植物检疫昆虫标本制作规范》
4.GB/T34756-2017《实时荧光定量PCR法检测植物病原物》
5.SN/T2124-2008《进出境植物检疫昆虫饲养技术规范》
检测设备
1.LeicaDM750生物显微镜(1000油镜观察鞘翅微结构)
2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(96孔板通量)
3.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机(最大转速30,000rpm)
4.MemmertIPP110恒温培养箱(温度波动度0.3℃)
5.OlympusSZX16体视显微镜(8:1变倍比虫卵观测)
6.SartoriusCP225D电子天平(0.01mg精度称量)
7.Agilent4200TapeStation系统(DNA完整性评估)
8.ThermoScientificHeratherm烘箱(样本预处理60℃烘干)
9.LeicaCM1950冷冻切片机(虫体组织切片厚度10μm)
10.PerkinElmerLambda365紫外分光光度计(DNA浓度测定)