检测项目

1. 病原菌分离培养:采用PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂),培养温度25±1℃,暗培养5-7天

2. 菌丝形态观察:测量菌丝直径(3.5-6.5μm)、隔膜间距(50-200μm)及分枝角度(45-90°)

3. 分生孢子检测:孢子尺寸范围(4.8-7.2×2.4-3.6μm),产孢量≥10^4 CFU/g

4. 根系侵染率测定:采用网格交叉法计算侵染面积比(0-100%)

5. DNA分子鉴定:ITS序列扩增(引物ITS1/ITS4),扩增产物长度500-600bp

检测范围

1. 栀子植株活体根系样本(直径≤5cm)

2. 栽培基质及周边土壤样本(深度0-30cm)<3> 3. 移栽苗木的木质部组织切片(厚度20-30μm)

4. 发病植株茎基部皮层组织(含水率≥60%)

5. 灌溉用水及农具表面附着物样本(采集量≥200ml/件)

检测方法

1. ISO 21469:2018《植物病原真菌分离培养规范》

2. GB/T 3543.4-2020《农作物种子检验规程 病害检验》

3. ASTM D7990-15《植物病原分子检测标准指南》

4. NY/T 401-2000《花卉病毒病检疫技术规程》

5. JIS K 3850-3:2021《空气中真菌测定方法》

检测设备

1. 奥林巴斯BX53显微镜(配DP27摄像系统):菌丝形态观测

2. Thermo Fisher MaxQ6000恒温培养箱:病原菌分离培养

3. Eppendorf Mastercycler X50 PCR仪:DNA扩增

4. Sartorius Quintix224-1CN分析天平(精度0.1mg):样本称量

5. BioTek Synergy H1酶标仪:核酸浓度测定

6. Leica CM1950冷冻切片机:组织样本处理

7. Memmert ICP600恒温摇床(转速50-400rpm):液体培养

8. Beckman Coulter Allegra X-30R离心机(最大转速30,000×g):DNA提取

9. Ohaus MB45水分测定仪(精度±0.1%):样本含水率分析

10. Thermo Scientific Heratherm烘箱(温度范围40-250℃):培养基制备