检测项目
1.鼻黏膜组织病理学检查:HE染色观察干酪样坏死灶直径(≥3mm)、朗格汉斯巨细胞数量(≥5个/HPF)、上皮样肉芽肿密度(≥2个/mm)
2.抗酸染色检测:Ziehl-Neelsen法阳性阈值(≥1条抗酸杆菌/100视野),荧光染色灵敏度(0.1-1CFU/mL)
3.结核分枝杆菌PCR检测:IS6110基因扩增Ct值≤38(探针法),RPOB基因突变位点分析(81bp热区)
4.干扰素释放试验:ESAT-6/CFP-10抗原刺激后IFN-γ浓度≥0.35IU/mL(ELISA法)
5.免疫组化标记:CD68+巨噬细胞密度(≥30%区域阳性),TNF-α表达强度(H-score≥150)
检测范围
1.鼻黏膜活检组织样本(甲醛固定石蜡包埋块)
2.鼻腔分泌物涂片(载玻片厚度1.0-1.2mm)
3.支气管肺泡灌洗液(体积≥5mL)
4.外周血单个核细胞(密度梯度离心法分离)
5.冷冻切片样本(保存温度-80℃2℃)
检测方法
1.组织病理学诊断:依据WHO结核病理诊断指南(2014版)及GB/T27628-2011病理切片制备规范
2.微生物培养:采用BACTECMGIT960系统(ISO15189:2012认证)进行液体培养
3.分子生物学检测:参照GB/T19439.1-2004核酸扩增技术要求执行XpertMTB/RIFUltra检测
4.免疫学分析:ELISA法按GB/T37868-2019免疫测定标准操作程序实施
5.质谱鉴定:MALDI-TOFMS菌种鉴定符合CLSIM58-A2标准要求
检测设备
1.LeicaRM2235石蜡切片机(切片厚度3-5μm可调)
2.OlympusBX53荧光显微镜(配备DP80双摄像头系统)
3.BACTECMGIT960全自动分枝杆菌培养系统(培养管容量7mL)
4.RocheCobasZ480实时荧光定量PCR仪(96孔模块温控精度0.3℃)
5.ThermoScientificMultiskanFC酶标仪(波长范围340-850nm)
6.BrukerMALDIBiotyper质谱仪(质量范围1,000-20,000Da)
7.SakuraTissue-TekPrisma全自动染色机(最大处理量300片/批次)
8.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机(最大转速15,000rpm)
9.MemmertINCOmed细胞培养箱(CO₂控制精度0.1%)
10.HamiltonSTARlet液体处理工作站(移液精度1%)