检测项目
1.形态特征鉴定:体长测量(0.8-1.2mm)、前翅斑纹形态比对(楔形透明斑纹)、后足胫节刺列数量(3-5列)
2.分子生物学检测:线粒体COI基因序列分析(658bp扩增片段)、28SrRNA基因特异性引物验证
3.寄主选择性测试:刺吸行为观测(EPG电子取食信号图谱)、产卵偏好性实验(日均产卵量≥15粒)
4.病毒携带检测:南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)RT-PCR检测(S9片段扩增)
5.抗药性监测:有机磷类药剂LC50值测定(乙酰胆碱酯酶活性抑制率≥80%)
检测范围
1.进出口农作物样本:水稻植株(Oryzasativa)、柑橘苗木(Citrusreticulata)等
2.植物检疫截获材料:木质包装残留物、新鲜枝叶样本
3.田间监测样本:黄板诱集标本(20cm25cm标准色板)、扫网采集成虫
4.实验室保种样本:75%酒精浸泡标本、-80℃超低温保存活体
5.昆虫分类标本:针插标本(体视显微镜观察用)、玻片标本(口器解剖结构)
检测方法
1.ISO23526:2020《植物检疫措施-叶蝉科昆虫形态鉴定技术规范》
2.GB/T35336-2017《水稻病毒病媒介昆虫检测技术规程》
3.SN/T5554-2022《进出口植物中Hishimonus属昆虫实时荧光PCR检测方法》
4.ASTME1752-17《植物病原媒介昆虫抗药性测定标准指南》
5.GB/T36850-2018《潜在入侵生物适生性评估技术规范》
检测设备
1.HitachiSU3500扫描电镜:用于口器结构及体表微刻纹观测(分辨率3nm)
2.LeicaM205C体视显微镜:配备DFC450数码相机进行形态测量(放大倍数8-160x)
3.Bio-RadCFX96实时荧光定量PCR仪:执行TaqMan探针法分子检测(灵敏度≤10拷贝)
4.Agilent4200TapeStation系统:进行DNA质量评估(DNA完整性数≥7)
5.OlympusBX53荧光显微镜:用于病毒原位杂交检测(激发波长488nm)
6.SartoriusCP225D电子天平:精确称量药剂剂量(精度0.01mg)
7.ThermoScientificHeratherm培养箱:维持恒温饲养条件(控温精度0.5℃)
8.KeyenceVHX-7000超景深三维显微镜:构建虫体三维形态模型(景深20mm)
9.WatersACQUITYUPLCH-Class系统:分析虫体内源代谢物(色谱柱BEHC181.7μm)
10.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪:检测血淋巴免疫细胞数量(通量1000细胞/秒)