可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 血清与血浆 | 疾病脂质标志物筛选、药效评价、人群队列研究 | 甘油磷脂亚类、鞘脂、游离脂肪酸、氧化脂质、胆固醇酯 | MTBE提取加内标校正,UHPLC-Q-TOF/MS非靶向筛查,QqQ-MS/MS靶向定量 |
| 动物组织 | 代谢机制研究、毒理病理评价、基因修饰模型表型分析 | 甘油三酯分子种、磷脂重塑、神经酰胺、心磷脂、溶血磷脂 | 组织匀浆加MTBE提取,C30反相与HILIC双柱分离,高分辨质谱全扫描加二级碎裂 |
| 细胞与细胞器 | 信号脂质研究、线粒体膜脂分析、药物干预机制验证 | 磷脂酰肌醇、心磷脂、鞘氨醇-1-磷酸、溶血磷脂酰胆碱 | 蛋白量归一化前处理,UHPLC-MS/MS多反应监测定量 |
| 食品与食用油脂 | 营养配方脂质谱表征、油脂掺伪鉴别、加工工艺评价 | 甘油三酯谱、sn-2位脂肪酸、磷脂含量、反式脂肪酸 | GB 5009.168-2016与GB/T 22223-2008气相色谱法,结合LC-MS分子种解析 |
| 微藻与微生物 | 产脂菌株筛选、发酵过程监控、生物柴油原料评价 | 总脂含量、脂肪酸组成、甘油三酯与甘油二酯分布 | Folch两相提取,脂肪酸甲酯化后GC-FID测定 |
| 乳与乳制品 | 母乳脂质组研究、婴幼儿配方食品脂质结构解析 | 乳脂肪球膜磷脂、神经节苷脂、胆固醇酯、鞘磷脂 | ISO 15885:2002甲酯化气相色谱,UHPLC-Q-TOF/MS全脂质谱扫描 |
检测项目
1. 脂质全景定性定量:覆盖LIPID MAPS分类八大类脂质,可鉴定脂质分子1500-6000种,质量精度小于5 ppm
2. 甘油磷脂亚类定量:磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇及溶血磷脂,定量下限0.01-1 ng/mL
3. 甘油三酯分子种解析:碳数40-60、双键0-12的甘油三酯分子种,可区分sn位脂肪酸组成差异
4. 鞘脂类定量:神经酰胺、鞘磷脂、葡糖神经酰胺与鞘氨醇-1-磷酸,QC样本相对标准偏差小于15%
5. 游离脂肪酸谱:C8:0至C24:1共40余种,内标法相对定量,线性相关系数大于0.995
6. 差异脂质统计分析:主成分分析与OPLS-DA建模,VIP值大于1、p值小于0.05且变化倍数大于1.5
检测范围
1. 生物体液样本:血清、血浆、尿液、脑脊液,取样量50-200 μL
2. 动物组织样本:肝脏、脑组织、脂肪组织、心肌与肠道组织,干重10-100 mg
3. 细胞样本:培养细胞每份1×10⁶-1×10⁷个,含线粒体等细胞器组分
4. 食品与油脂基质:乳制品、食用油脂、肉制品、婴幼儿配方食品、功能食品
5. 微生物与发酵体系:微藻、酵母、乳酸菌发酵液、活性污泥
6. 特殊基质:粪便、乳汁、皮脂分泌物、植物种子含油组织
检测方法
1. GB 5009.168-2016 食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定:气相色谱法测定脂肪酸组成,用于脂质分子种水解验证
2. GB/T 22223-2008 食品中总脂肪酸、饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的测定:内标法气相色谱定量
3. ISO 12966-2:2017 动植物油脂脂肪酸甲酯气相色谱分析 第2部分:脂肪酸甲酯的制备规范
4. GB/T 17377-2008 动植物油脂 脂肪酸甲酯气相色谱分析:分离度与定量重复性控制
5. ISO 15885:2002 乳脂 脂肪酸甲酯气相色谱分析:乳制品基质脂质谱参考方法
6. AOAC 996.06 食品中总脂肪、饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸测定:酶水解提取后气相色谱测定
检测设备
1. 超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用仪:质量范围m/z 50-1500,质量精度小于3 ppm,正负离子切换采集
2. 超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱联用仪:多反应监测模式,每秒可监测500个以上离子对,线性范围五个数量级
3. 静电场轨道阱高分辨质谱仪:分辨率70000以上,用于脂质精确质量与同位素轮廓确证
4. 高速冷冻离心机:最高转速15000 r/min,温控4℃,相对离心力可达20000×g
5. 组织研磨匀浆仪:振荡频率5-30 Hz,适配2 mL与50 mL研磨罐,低温夹套控温
6. 氮吹浓缩仪:控温室温至60℃,氮气压力0-0.4 MPa,十二位独立针阀控制
7. 真空冷冻干燥机:冷阱温度-80℃,极限真空度小于5 Pa,用于组织样本预冻干
8. 分析天平:可读性0.01 mg,量程220 g,内部校准
9. C30与HILIC液相色谱柱:柱长100-150 mm,粒径1.7-2.6 μm,耐压1000 bar
10. 超低温保存箱:控温-86至-40℃,温度波动±3℃,保障脂质样品稳定性