可送检的样品类型与对应检测项目

样品类型 典型应用场景 主要检测项目 常用方法 / 参考
中药与植物提取物 植物药活性部位筛选、中药配方颗粒药效物质基础研究、经典名方开发 一氧化氮释放抑制率、TNF-α与IL-6分泌抑制、PGE2水平、COX-2与iNOS表达 LPS诱导RAW264.7巨噬细胞炎症模型，Griess试剂分光光度法与ELISA双抗体夹心法联用
保健食品功能因子 活性肽、多糖、多酚功效验证，功能声称数据支撑 IL-1β与IL-8分泌抑制、IL-10上调幅度、巨噬细胞吞噬活力、中性粒细胞迁移抑制 THP-1分化巨噬细胞模型与Transwell趋化小室法，流式细胞术表型分析
化妆品原料与配方 舒缓类功效宣称支撑、敏感肌适用性原料筛选 肥大细胞脱颗粒抑制（β-己糖苷酶释放）、组胺释放抑制、角质形成细胞IL-8分泌 RBL-2H3肥大细胞模型与HaCaT角质形成细胞模型，酶底物法与ELISA联用
医疗器械浸提液 材料炎症相容性评价、生物学评价炎症终点补充 浸提液对炎症因子分泌的影响、细胞活力平行控制、巨噬细胞活化程度 GB/T 16886.5-2017浸提液法与ISO 10993-12样品制备原则，MTT法活力控制
创面敷料与医用生物材料 抗炎功能敷料研发、敷料浸提液炎症响应评价 M1/M2巨噬细胞极化标志物、中性粒细胞弹性蛋白酶活性、补体激活产物 流式细胞术CD86与CD206标记分析，参照GB/T 14233.2-2005生物学试验方法体系
化学合成化合物 先导化合物抗炎活性筛选、构效关系研究 量效曲线、半数抑制浓度IC50、选择性指数、细胞毒性窗口 96孔板系列浓度稀释加四参数非线性回归拟合，MTT法同步活力控制
微生物发酵产物与后生元 发酵代谢物功效验证、后生元与益生元协同效应评价 IL-8分泌抑制、TLR4通路活化阻断、短链脂肪酸协同抗炎效应 Caco-2与HT-29肠道上皮细胞炎症模型，RT-qPCR相对定量与ELISA联用

检测项目

1. 一氧化氮释放抑制率：LPS 1微克每毫升诱导RAW264.7细胞24小时，Griess法540纳米比色，受试浓度通常12.5至200微克每毫升

2. TNF-α与IL-6分泌抑制：ELISA双抗体夹心法测定培养上清，灵敏度皮克每升级，以半数抑制浓度IC50表征活性强度

3. IL-1β与IL-8水平测定：双抗体夹心ELISA，标准曲线拟合决定系数不低于0.99

4. PGE2与组胺释放抑制：竞争法ELISA与酶底物法联用，评价环氧化酶通路与肥大细胞脱颗粒抑制

5. COX-2与iNOS基因表达：RT-qPCR双ΔCt相对定量，内参基因选用甘油醛-3-磷酸脱氢酶与肌动蛋白

6. 细胞活力平行控制：MTT法570纳米或CCK-8法450纳米测定，受试浓度下活力保留率不低于百分之八十方可判读抗炎数据

检测范围

1. 细胞模型：RAW264.7小鼠巨噬细胞、THP-1人单核细胞（PMA分化）、小鼠腹腔原代巨噬细胞

2. 炎症诱导剂：大肠杆菌来源脂多糖LPS、佛波酯PMA、伴刀豆球蛋白A

3. 样品类型：中药与植物提取物、活性肽与多糖、功能食品因子、化妆品原料、器械浸提液、合成化合物

4. 炎症介质：一氧化氮、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、PGE2、组胺

5. 分子靶点：COX-2、iNOS、NF-κB p65核转位、NLRP3炎症小体、TLR4通路

6. 阳性对照药物：地塞米松、吲哚美辛、塞来昔布与一氧化氮合酶抑制剂

检测方法

1. GB/T 16886.1-2022 医疗器械生物学评价 第1部分：风险管理过程中的评价与试验，器械类样品炎症风险整合评价框架

2. GB/T 16886.5-2017 医疗器械生物学评价 第5部分：体外细胞毒性试验，浸提液处理与活力平行控制依据

3. GB/T 14233.2-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法 第2部分：生物学试验方法，医用器具类样品试验体系

4. GB/T 16175-2008 医用有机硅材料生物学评价试验方法，硅橡胶敷料类样品浸提与评价参考

5. ISO 10993-5:2009 医疗器械生物学评价 体外细胞毒性试验，与国标配套的浸提液试验方法

6. ISO 10993-12:2021 医疗器械生物学评价 样品制备与参照样品，浸提比例与浸提条件设定原则

7. 《中华人民共和国药典》2025年版四部生物活性测定相关通则，活性测定与生物检定统计方法参照执行

检测设备

1. 二氧化碳恒温培养箱：温度控制37℃±0.5℃，二氧化碳浓度5%，相对湿度95%以上

2. 垂直流超净工作台：洁净度百级，配紫外灭菌与高效空气过滤系统

3. 倒置生物显微镜：相差观察，放大倍数40至400倍，附显微摄像系统

4. 全波长酶标仪：波长范围200至1000纳米，分辨率1纳米，支持双波长与动力学检测

5. 实时荧光定量PCR仪：96孔反应模块，升降温速率每秒3℃以上，支持熔解曲线分析

6. 化学发光凝胶成像系统：配合垂直电泳与转膜装置完成蛋白表达半定量分析

7. 高速冷冻离心机：最高转速15000rpm，温控范围4℃至室温

8. 零下86℃超低温冰箱：细胞株、血清与检测试剂盒分级保存

9. 自动细胞计数仪：台盼蓝排斥法，细胞浓度与活力一次读出

10. 电动移液器系统：量程0.1微升至1000微升，八道与单道配置，加样误差小于百分之二